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更新日期2025-01-22 10:34
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全自動多肽合成儀的操作流程通常包括以下幾個關(guān)鍵步驟:
一、前期準(zhǔn)備
1.選擇合適的樹脂和氨基酸:根據(jù)所需合成的多肽序列,選擇適合的樹脂和氨基酸。
2.設(shè)備調(diào)試:由專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行設(shè)備的安裝和調(diào)試,確保設(shè)備能夠正確運行。
3.編程:根據(jù)多肽序列,在合成儀的軟件系統(tǒng)中編寫合成程序。
二、合成步驟
1.脫保護(hù):去除前一個氨基酸的保護(hù)基團(tuán),使其能夠與下一個氨基酸發(fā)生反應(yīng)。這一步驟通常使用溶劑(如哌啶)來去除Fmoc(9-芴甲氧羰基)保護(hù)的氨基基團(tuán)。
2.活化與偶聯(lián):將下一個氨基酸的羧基活化,然后與被脫保護(hù)的氨基反應(yīng),形成肽鍵。這一步驟通常使用活化劑(如HBTU或TBTU)和DIEA來促進(jìn)反應(yīng)。
3.洗滌:清洗掉未反應(yīng)的物質(zhì)和副產(chǎn)物,確保反應(yīng)的純度。這一步驟通常使用DMF等有機溶劑進(jìn)行洗滌。
4.循環(huán):重復(fù)脫保護(hù)、活化與偶聯(lián)以及洗滌的步驟,直到多肽鏈達(dá)到預(yù)定長度。
三、后處理
1.切割:將合成的多肽從樹脂上切割下來。這一步驟通常使用酸性試劑(如TFA)進(jìn)行切割。
2.提純:通過高效液相色譜(HPLC)等方法對切割下來的多肽進(jìn)行提純,得到目標(biāo)多肽。
3.干燥與保存:將提純后的多肽進(jìn)行干燥處理,并妥善保存以備后續(xù)使用。
四、注意事項
1.操作規(guī)范:嚴(yán)格按照合成儀的操作手冊進(jìn)行操作,避免誤操作導(dǎo)致設(shè)備損壞或合成失敗。
2.安全防護(hù):在操作過程中佩戴好防護(hù)用品,如手套、口罩等,避免有機溶劑等有害物質(zhì)對皮膚和呼吸道造成傷害。
3.質(zhì)量控制:在合成過程中要嚴(yán)格控制每一步的反應(yīng)條件和反應(yīng)時間,確保合成產(chǎn)物的質(zhì)量和純度。
綜上所述,全自動多肽合成儀的操作流程是一個復(fù)雜而精細(xì)的過程,需要嚴(yán)格按照操作手冊進(jìn)行規(guī)范操作,并注意安全防護(hù)和質(zhì)量控制。
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https://www.chem17.com/st636793/list_2545804.html
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